1.執行標準
《GB 5413.37—2010 食品安全國家標準 乳和乳制品中黃曲霉毒素M1 的測定》
2.樣品前處理
牛乳樣品：
? 稱取 50 mL 牛乳樣品，加熱到 35℃~37℃；
? 于 10000r/min 離心 15 min；
? 去除乳脂及沉淀，取上層全部溶液用于上樣檢測。稀釋倍數：0.02固體奶粉及制品：
? 10 g 固體樣品，用 50 mL 50℃ 熱蒸餾水溶解混勻；
? 冷卻至 20℃，并定容至 100 mL；
? 于 10000 r/min 離心15 min；
? 去除乳脂及沉淀；
? 取上層溶液10 mL，用蒸餾水定容至50 mL；
? 取定容后的液體，全部用于上樣檢測。稀釋倍數：1
3.操作步驟
? 取出免疫親和柱，將上方塞子取出斜剪斷，再插回親和柱上；(3 mL 的免疫親和柱去掉上方塞子，安裝上轉接頭，將轉接頭另一端與針筒固定后使用)
? 將柱子與氣控操作架上的針筒連接固定，處理后的溶液上樣；
? 去掉親和柱下方堵頭，調節開關，使液體以 1~2d/s 的速度流出；
? 待液體排干后，更換新針筒，用 10 mL 蒸餾水洗滌 1次，流速 2~3d/s；
? 待液體排干后，更換新針筒，上樣 1 mL 甲醇，用樣品瓶接洗脫液，流速 1d/s；
? 洗脫后液體可用于檢測。
4. 注意事項
? 使用前，免疫親和柱需回至室溫 (22~25℃)。
? 每次上樣前都要將上次液體完全排干。
? 也適用于 GB 5413.37-2010。
5.色譜條件
色譜柱：Venusil? XBP C18(L)；150 mm×2.1 mm，5 μm；
流動相：A 液，0.1% 甲酸溶液；
B 液，乙腈:甲醇溶液 (1:1)；
流 速：1.0 mL/min； 柱 溫：35℃；
試液溫度：20℃； 進樣量：10 μL；
梯度洗脫：
時間(min) | 流動相A% | 流動相B% | 梯度變化曲線 |
0 | 68 | 32 | - |
4.2 0 | 55 | 45 | 6 |
5.0 0 | 0 | 100 | 6 |
5.7 0 | 0 | 100 | 1 |
6.0 0 | 68 | 32 | 6 |
注：1為即時變化,6為線性變化。
檢測方式：多離子反應監測(MRM)，詳見表1中母離子、子離子和碰撞能量。
離子源控制條件：
電離方式 | 電噴霧電離，負離子 |
毛細管電壓(kV) | 3.5 |
錐孔電壓(V) | 45 |
射頻透鏡1電壓(V) | 12.5 |
射頻透鏡2電壓(V) | 12.5 |
離子源溫度(℃) | 120 |
錐孔反吹氣流量(L/h) | 50 |
脫溶劑氣溫度(℃) | 350 |
脫溶劑氣流量(L/h) | 500 |
電子倍增電壓(V) | 650 |
6.訂貨指南
產品名稱 | 規格包裝 | 訂貨號 |
Venusil? XBP C18(L) | 2.1×250 mm, 5 μm, 100 ? | VX951502-L |
黃曲霉毒素 M1免疫親和柱 | 3 mL | BAC09003-1 |
7. 質控指標
項目：黃曲霉毒素M1
標準：GB5413.37—2010
限量：0.5 μg/kg
表1 離子選擇參數表 | ||||||
黃曲霉毒素 | 母離子 | 定量子離子 | 碰撞能量 | 定性子離子 | 碰撞能量 | 離子化方式 |
M1 | 329 | 273.5 | 22 | 259.5 | 22 | ESI+ |
應用編號：AF10018
